Сучасні методи діагностики ВІЛ-інфекції

Своєчасна діагностика ВІЛ-інфекції стає вкрай важливим заходом, оскільки раніше початок лікування може багато в чому визначити подальший розвиток захворювання і продовжити життя хворого на Снід. В останні роки спостерігається вагомий прогрес у галузі виявлення цієї страшної хвороби: на зміну старим тест-систем приходять досконаліші методи обстеження стають доступнішими, і їх точність значно підвищується.

У цій статті розповімо про сучасні методи діагностики ВІЛ-інфекції, знати які корисно для своєчасного лікування даної проблеми і підтримки нормальної якості життя хворого.

Зміст

  • 1 Методики діагностики ВІЛ
  • 2 ІФА тест-системи
  • 3 Чому ІФА-тест може давати псевдопозитивні результати?
  • 4 Імунний блоттінг
  • 5 Полімеразна ланцюгова реакція
  • 6 Експрес-методи

Методики діагностики ВІЛ

У Росії для діагностики ВІЛ-інфекції проводиться стандартна процедура, що включає в себе два рівні:


  • ІФА тест - система (скринінговий аналіз);
  • імунний блоттінг (ІБ).

Також для діагностики можуть застосовуватись інші методики:

  • ПЛР;
  • експрес-тести.

Современные методы диагностики ВИЧ-инфекции

ІФА тест-системи

На першому етапі діагностики для виявлення ВІЛ-інфекції застосовується скринінговий тест (ІФА), який заснований на створених в лабораторіях білки ВІЛ, що уловлюють виробляються в організмі у відповідь на інфікування специфічні антитіла. Після їх взаємодії з реагентами (ферментами) тест-системи змінюється забарвлення індикатора. Далі ці зміни кольору обробляються на спеціальній апаратурі, яка і визначає результат виконаного аналізу.

Такі ІФА-тести здатні показувати результат вже через кілька тижнів після впровадження ВІЛ-інфекції. Цей аналіз визначає не наявність вірусу, а виявляє вироблення антитіл до нього. Іноді, в організмі людини вироблення антитіл до ВІЛ починається через 2 тижні поле зараження, але у більшості людей вони виробляються на більш пізніх термінах, через 3-6 тижнів.

Існує чотири покоління ІФА-тестів з різною чутливістю. В останні роки частіше застосовуються тест-системи III і IV покоління, які створені на основі синтетичних пептидів або рекомбінантних білків і володіють більшою специфічністю та точністю. Вони можуть використовуватися для діагностики ВІЛ-інфекції, моніторингу поширеності ВІЛ та забезпечення безпеки при перевірці донорської крові. Точність ІФА-тест-систем III і IV покоління становить 93-99% (більш чутливі тести, які випускаються в країнах західної Європи – 99%).

Современные методы диагностики ВИЧ-инфекцииДля виконання ІФА-тесту проводиться забір 5 мл крові з вени пацієнта. Між останнім прийомом їжі і аналізом повинно пройти не менше 8 годин (як правило, він виконується вранці натщесерце). Такий тест рекомендується здавати не раніше, ніж через 3 тижні після передбачуваного зараження (наприклад, після незахищеного статевого акту з новим статевим партнером).

Результати ІФА-тесту виходять через 2-10 днів:

  • негативний результат: вказує на відсутність інфікування ВІЛ і не потребує звернення до фахівця;
  • псевдонегативний результат: може спостерігатися на ранніх термінах інфікування (до 3 тижнів), при пізніх стадіях Сніду при вираженому пригніченні імунітету і при неправильно проведеної підготовці крові;
  • хибнопозитивний результат: може спостерігатися при деяких захворюваннях і при неправильно проведеної підготовці крові;
  • позитивний результат: вказує на зараження ВІЛ інфекцією, вимагає проведення ІБ і звернення пацієнта до фахівця в центр Сніду.

Чому ІФА-тест може давати псевдопозитивні результати?

Хибнопозитивні результати ІФА-тест на ВІЛ можуть спостерігатися при неправильній обробці крові або у хворих з такими станами і захворюваннями:

  • множинна мієлома;
  • алкогольний гепатит;
  • інфекційні захворювання, спровоковані вірусом Епштейна-Барр;
  • стан після діалізу;
  • аутоімунні захворювання;
  • на тлі вагітності;
  • стан після вакцинації.

При вищеописаних причин в крові можуть бути неспецифічні перехресно реагують антитіла, вироблення яких була спровокована не ВІЛ-інфекцією.

В останні роки частота хибнопозитивних результатів істотно знизилася завдяки застосуванню тест-систем III і IV покоління, які містять більш чутливі пептидні і рекомбінантні білки (вони синтезуються за допомогою генної інженерії in vitro). Після початку застосування таких ІФА-тестів частота хибнопозитивних результатів значно знизилася і становить близько 0,02-0,5%.

Виявлення хибнопозитивної результату не означає, що людина інфікована ВІЛ. У таких випадках ВООЗ рекомендує провести ще один ІФА-тест (обов'язково IV покоління).

Кров пацієнта відправляється в референс або арбітражну лабораторію з позначкою «повторити» і досліджується на ІФА тест-системи IV покоління. Якщо результат нового аналізу негативний, то перший результат визнається помилковим (хибнопозитивним) і ІБ не проводиться. При позитивному або сумнівному результаті під час другого тесту хворому обов'язково призначається проведення ІБ через 4-6 тижнів для підтвердження або спростування ВІЛ-інфікування.

Современные методы диагностики ВИЧ-инфекции

Імунний блоттінг

Остаточний діагноз інфікування ВІЛ може встановлюватися лише після отримання позитивного результату імунного блот (ІБ). Для його здійснення застосовується нитроцеллюлозна смужка, на яку нанесені вірусні білки.

Забір крові для ІБ виконується з відня. Далі вона піддається спеціальній обробці і містяться в її сироватці білки поділяють на спеціальному гелі за їх заряду та молекулярної маси (маніпуляція проводиться на спеціальній апаратурі під впливом електричного поля). На гель із сироватки крові накладають нітроцелюлозну смужку і проводять блоттінг («промакивание») в спеціальній камері. Смужка обробляється і якщо у використовуваних матеріалах є антитіла до ВІЛ, то вони зв'язуються з антигенними смугами на ІБ і проявляються у вигляді ліній.

ІБ вважається позитивним, якщо:

  • за критеріями American CDC – на смужці є дві або три лінії gp41, p24, gp120/gp160;
  • за критеріями American FDA – на смужці є дві лінії р24, р31 і лінія др41 або др120/др160.

У 99,9% випадків позитивний результат ІБ вказує на ВІЛ-інфікування.

При відсутності ліній – ІБ є негативним.

При виявленні ліній з др160, др120 і др41 - ІБ є сумнівним. Такий результат може виявлятися при:


  • початкових стадіях ВІЛ-інфікування ;
  • туберкульозі;
  • онкологічних захворюваннях;
  • вагітності;
  • частих трансфузиях крові.

У таких випадках рекомендується проведення повторного дослідження за допомогою набору іншої фірми. Якщо ж після додаткового ІБ результат залишається сумнівним, то необхідно спостереження протягом півроку (через кожні 3 місяці проводяться ІБ).

Полімеразна ланцюгова реакція

Тест на ПЛР може визначати РНК вірусу. Його чутливість досить висока і він дозволяє виявляти ВІЛ-інфікування вже через 10 днів після зараження. У деяких випадках ПЛР може давати псевдопозитивні результати, оскільки його висока чутливість може реагувати і на антитіла до інших інфекцій.

Дана методика діагностики є дорогою, вимагає спеціального устаткування і високої кваліфікації фахівців. Ці причини не дають можливості проводити її при масовому тестуванні населення.

ПЛР застосовується у таких випадках:

  • для виявлення ВІЛ у новонароджених, які народилися від ВІЛ-інфікованих матерів;
  • для виявлення ВІЛ в «період вікна» або при сумнівному ІБ;
  • для контролю концентрації ВІЛ у крові;
  • для дослідження донорської крові.

Тільки по тесту ПЛР діагноз ВІЛ не ставиться, а проводиться в якості додаткового методу діагностики для вирішення спірних ситуацій.

Експрес-методи

Современные методы диагностики ВИЧ-инфекцииОднією з інновацій в діагностиці ВІЛ стали експрес-тести, результати яких можуть оцінюватися вже через 10-15 хвилин. Найбільш ефективні і точні результати виходять при допомоги іммунохроматографічних тестах, заснованих на принципі капілярного потоку. Вони являють собою спеціальні смужки, на які наноситься кров або інші досліджувані рідини (слина, сеча). При наявності антитіл до ВІЛ через 10-15 хвилин на тесті з'являються кольорова і контрольна смужка – позитивний результат. При негативному результаті – з'являється тільки контрольна смужка.

Як і після тестів ІФА, результати експрес-тестів повинні підтверджуватися аналізом ІБ. Тільки після цього може ставитися діагноз ВІЛ-інфекції.

Існують експрес-набори для домашнього тестування. Тест OraSure Technologies1 (США) схвалений FDA, продається без рецепта і може застосовуватися для виявлення ВІЛ. Після проведення тесту, в разі позитивного результату, хворому рекомендується пройти обстеження у спеціалізованому центрі для підтвердження діагнозу.

Інші тести для домашнього використання ще не були схвалені FDA і їх результат може бути дуже сумнівним.

Незважаючи на те, що експрес-тести по своїй точності поступаються ІФА-тестів IV покоління, вони широко застосовуються для додаткового тестування населення.

Здати аналізи на виявлення ВІЛ-інфекції можна в будь-якій поліклініці, ЦРЛ або в спеціалізованих СНІД-центрах. На території Росії вони проводяться абсолютно конфіденційно, або анонімно. Кожен пацієнт може розраховувати на отримання медичної чи психологічної консультації до або після проведення аналізу. Платити за тести на ВІЛ доведеться тільки в комерційних лікувальних установах, а в державних поліклініках і лікарнях вони виконуються безкоштовно.

Про те, якими шляхами можна заразитися ВІЛ-інфекцією і які міфи існують про можливості заразитися, читайте в цій статті.






Лікування схожих захворювань

Додати коментар
Ваше Ім'я:


Введіть код: